Yüksək Performanslı Maye Xromatoqrafiyası (HPLC) analizində dəqiq nəticələr üçün aydın, kəskin zirvə çox vacibdir. Bununla belə, mükəmməl pik formaya nail olmaq çətin ola bilər və bir çox amillər pis nəticələrə səbəb ola bilər. HPLC-də pis pik forması sütunun çirklənməsi, həlledicinin uyğunsuzluğu, ölü həcm və nümunənin düzgün işləməməsi kimi müxtəlif problemlərdən qaynaqlana bilər. Bu ümumi səbəbləri anlamaq və onları necə həll etmək dəqiq və etibarlı xromatoqrafik nəticələri saxlamaq üçün vacibdir.
Sütun çirklənməsinin Pik Formaya Təsiri
HPLC-də pis pik formasının əsas səbəblərindən biri sütunun çirklənməsidir. Vaxt keçdikcə nümunədən və ya həlledicilərdən olan çirkləndiricilər sütunda toplana bilər ki, bu da zəif ayrılmağa və təhrif olunmuş zirvələrə gətirib çıxarır. Bu çirklənmə quyruq və ya ön zirvələrlə nəticələnə bilər, hər ikisi analizinizin keyfiyyətinə əhəmiyyətli dərəcədə təsir göstərə bilər.
Sütunların çirklənməsinin qarşısını almaq üçün sütunun müntəzəm təmizlənməsi və düzgün saxlanması vacibdir. Təmizləmə protokollarına dair istehsalçının tövsiyələrinə əməl edin və çirklənməni minimuma endirmək üçün yüksək saflıqda həlledicilərdən və nümunə preparatlarından istifadə edin. Çirklənmə davam edərsə, sütunun dəyişdirilməsi lazım ola bilər.
Solventin Uyğunsuzluğu və Onun Pik Keyfiyyətə Təsiri
Pik formasının zəif olmasının başqa bir ümumi səbəbi nümunə həlledici ilə mobil faza həlledicisi arasında uyğunsuzluqdur. Əgər həlledicilər uyğun deyilsə, bu, nümunənin zəif enjeksiyonuna və zəif ayrılmasına gətirib çıxara bilər, nəticədə daha geniş və ya əyri zirvələr yaranır.
Bu problemi həll etmək üçün həmişə nümunə həlledicinizin mobil faza ilə uyğun olduğundan əmin olun. Buna oxşar polariteli həlledicilərdən istifadə etməklə və ya nümunəni düzgün seyreltməklə nail olmaq olar. Təhlillərə mane ola biləcək hər hansı çöküntülərin əmələ gəlməsinin qarşısını almaq üçün təzə həlledicilərdən istifadə etmək də yaxşı təcrübədir.
Ölü həcm problemləri və onların həlli
Ölü həcm sistem daxilində nümunə və ya mobil fazanın durğunlaşdığı injektor və ya boru kimi sahələrə aiddir. Nümunə sistemdən düzgün axmadığı üçün bu, pik genişlənmə və ya təhrif olunmuş formalar kimi problemlərə səbəb ola bilər. Ölü həcm çox vaxt düzgün olmayan sistem qurulmasının və ya HPLC proqramları üçün nəzərdə tutulmayan komponentlərin istifadəsinin nəticəsidir.
Ölü həcm problemlərini həll etmək üçün sisteminizdə nümunənin durğunlaşa biləcəyi sahələr üçün müntəzəm olaraq yoxlayın. Bağlantılarınızın sıx olduğundan, boruların düzgün ölçüdə olduğundan və heç bir bükülmə və ya sızma olmadığından əmin olun. Ölü həcmin minimuma endirilməsi pik forma və ayırdetmə qabiliyyətini əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdıra bilər.
Nümunələrin idarə edilməsi və enjeksiyon vasitələrinin rolu
Dəqiq və təkrarlana bilən nəticələr əldə etmək üçün nümunənin düzgün işləməsi çox vacibdir. Pik formasının ən çox diqqətdən kənarda qalan səbəblərindən biri şprislər, iynələr və nümunə flakonları kimi inyeksiya alətlərinin düzgün istifadə edilməməsidir. Çirkli və ya zədələnmiş şpris çirkləndiriciləri daxil edə və ya uyğun olmayan inyeksiyalara səbəb ola bilər ki, bu da pis pik formasına gətirib çıxarır.
Həmişə təmiz, yüksək keyfiyyətli şpris və iynələrdən istifadə etdiyinizə əmin olun və nümunə flakonunu həddən artıq yükləməyin. Bundan əlavə, düzgün növ nümunə flakonundan istifadə çirklənmənin qarşısını almağa və maksimum konsistensiyanı saxlamağa kömək edə bilər. Optimal performansı təmin etmək üçün hər hansı köhnəlmiş və ya zədələnmiş komponentləri mütəmadi olaraq yoxlayın və dəyişdirin.
Optimal Pik Forma üçün HPLC Sisteminizi Necə Saxlamaq olar
HPLC-də pis pik formasının qarşısının alınması sistemə düzgün texniki qulluqdan başlayır. Daimi təmizləmə, diqqətli həlledici seçimi və düzgün nümunə ilə işləmə yaxşı xromatoqrafik performansı təmin etmək üçün açardır. Sisteminizi saxlamaq üçün bu addımları yerinə yetirin:
Sütununuzu istehsalçının təlimatlarına uyğun olaraq mütəmadi olaraq təmizləyin və dəyişdirin.
Yalnız yüksək təmizlikli həlledicilərdən istifadə edin və çirklənmənin qarşısını almaq üçün nümunələrinizi diqqətlə hazırlayın.
HPLC sistem komponentlərinizi yoxlayaraq və onlara qulluq etməklə ölü həcmi minimuma endirin.
Təmiz, yüksək keyfiyyətli inyeksiya alətləri və flakonlarla nümunələrin düzgün idarə olunmasını təmin edin.
Nəticə: Düzgün qayğı ilə ardıcıl, kəskin zirvələrə nail olun
HPLC-də zəif pik forması sinir bozucu bir problem ola bilər, lakin ümumi səbəbləri başa düşmək və bir neçə sadə texniki addımı izləməklə nəticələrinizi əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdıra bilərsiniz. Müntəzəm sistem yoxlamaları, nümunənin düzgün hazırlanması və yüksək keyfiyyətli komponentlərdən istifadə optimal pik formasını və xromatoqrafiya performansını qorumaq üçün vacibdir.
HPLC sisteminizin uzunömürlülüyünü və düzgünlüyünü təmin etmək üçün sistemə texniki qulluqda ayıq və fəal olmaq vacibdir. Əgər pik forma ilə bağlı problemlərlə üzləşirsinizsə və ya HPLC sisteminizi optimallaşdırmaqda yardıma ehtiyacınız varsa, əlaqə saxlayınXromasirehtiyaclarınıza uyğunlaşdırılmış ekspert məsləhətləri və həllər üçün bu gün.
Göndərmə vaxtı: 28 aprel 2025-ci il